2001년 KBS의 공채 16기 개그맨으로 데뷔했습니다. 참고로, 16기 최연장자였기 때문에 해당 기수의 반장이었습니다. 개그콘서트의 박준형의 생활사투리, 도레미 트리오 등으로 큰 인기를 끌었지만 어느 순간부터 방송을 쉬고 있습니다. 그 이유는 탁재훈의 권유에 따라 개그콘서트를 포기하고 연기자로 전향해서 탁재훈의 영화에 조연으로 출연했다가 대차게 망하면서 오도가도 못하는 신세가 되어버린 것. 사실 이전부터 전라도 사투리 컨셉을 빼면 도레미 트리오, 생활사투리 외에는 모두 그렇게 꾸준히 잘 나간 코너가 없었기 때문에 개그맨으로써 한계가 있다는 점도 지적됐지만, 개그맨이 다른 직장 찾다가 그대로 가라앉는 사례로 남았습니다. 이는 이후 탁재훈이 출연한 라디오 스타에도 언급됩니다. 개그 콘서트 400회 특집에서 '다시 보고 싶은 코너' 1위를 도레미 트리오가 차지했는데, 2위를 차지했던 고음불가가 대신 방송되었습니다. 이 때문에 '개그 콘서트 제작진들과 이재훈 사이에 뭔가 안 좋은 일이 있던 것 아니냐'라는 의혹이 일었지만 개그 콘서트에서는 그런 것과 관련이 없다고 밝혔습니다.
개그 콘서트에서 해명한 바에 따르면, 고음불가가 초반에는 앞서서 고음불가를 준비하고 있었으나 막판에 도레미 트리오가 역전해 준비할 시간이 없었다고 합니다. 2006년엔 뮤지컬에 출연했지만 오래가지 못했습니다. 2010년 추석특집 달인쇼에서 간만에 TV에 나와서 모창을 보여줬습니다. 같은 해 4살 연하의 아내와 3년 연애끝에 결혼했습니다.
기사 참고. 2011년 4월 10일 과거 도레미 트리오에서 같이 활동했던 김인석의 도움으로 디테일 김이라는 코너에 개그계에 돌아왔지만 이미 개그계로 돌아서기에는 늦어버렸고 그 코너가 1화만에 코너가 종료되어 지금은 아는 사람만이 아는 비운의 개그맨이 되어버린 신세. 즉, 한 마디로 지못미. 2011년 9월 17일 부터 시작한 코미디빅리그에서 개그맨으로서 개통령 팀 멤버로 다시 활동하기 시작했습니다. 여담으로, 2011년 영화 가문의 수난에서 일본 경찰 역으로 출연했습니다. 개그 콘서트 700회 특집에서 정형돈, 김기리 등과 함께 도레미 트리오에 등장했고 2013년 7월 23일 1 대 100에서 100인으로 출연해 우승하면서 적립금 400만원을 받아갔습니다. 2016년에는 MBC의 아침 드라마 좋은 사람에서 박명수 역으로 출연했습니다.
현재는 김시덕과 함께 유튜브에서 사투리TV로 활동 중입니다. 사투리TV 이재훈 김시덕2019년 8월 11일, 개그콘서트 개편으로 신설된 2019 생활사투리를 통해 개그콘서트에 복귀했습니다. 그런데 8개월 뒤 개그콘서트는 종영되고 말았습니다. 2021년 현재 KBS 재난탈출 생존왕에서 보통남 역할로 출연 중이며, 2021년 3월 22일자 근황올림픽 영상에서 전라북도 임실군에 카페를 차려 영업하고 있다고 하였습니다.
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